转染试剂有哪些
转染试剂的分类及其应用领域
转染试剂在基因工程中扮演着至关重要的角色,它们根据作用机制、适用核酸类型及细胞类型的不同,被细分为多个类别。
一、按作用机制分类
1. 化学介导类
阳离子多聚物如DEAE-葡聚糖,通过结合核酸促进细胞摄取,特别适用于哺乳动物细胞。而像Serochem PEI这样的聚乙烯亚胺,则常在悬浮培养的HEK293和CHO细胞中使用,以其低成本和高效率受到青睐。
2. 脂质体类
Lipofectamine系列转染试剂是这一类别中的佼佼者。其中,Lipofectamine 2000适用于常见的贴壁和悬浮细胞,如HeLa;而针对难转染的癌细胞,如肺癌和癌细胞等,则推荐使用Lipofectamine 3000。针对siRNA转染,有专门的Lipofectamine RNAiMAX,它支持原代细胞和干细胞的转染。国产的RFect Prime转染试剂,作为一种纳米材料试剂,可以同时转染DNA和siRNA,具有低毒性和高效率的特点。
3. 物理介导类
电穿孔法,如Neon电穿孔系统,主要用于悬浮细胞的转染。
二、按适用核酸类型分类
对于DNA转染,Lipofectamine LTX适用于CHO细胞及原代成纤维细胞;jetPRIME则支持多种贴壁细胞的DNA/siRNA共转染。在siRNA转染方面,Lipofectamine RNAiMAX表现出色,尤其针对难转染的细胞。CRISPR-Cas9共递送试剂如Lipofectamine CRISPRMAX,在多种细胞中验证有效。
三、按细胞类型分类
主流产品如Lipofectamine 2000或PEI适用于常见的细胞系如HeLa和HEK293。对于难转染的细胞,如癌细胞(如A549、ASPC-1),推荐使用更专业的转染试剂如Lipofectamine 3000。原代细胞及干细胞则适合使用如Lipofectamine RNAiMAX或MessengerMAX等特定试剂。
四、其他类型
传统的化学转染方法如磷酸钙法成本较低但效率不稳定。还有病毒转染试剂,这是一种生物介导的方法,需要结合特定的病毒载体进行。
转染试剂的选择是一个综合考虑的过程,需要考虑核酸类型、细胞特性以及实验需求。主流产品如Lipofectamine系列能够覆盖广泛的转染场景,而国产试剂在某些特定应用中也有出色的表现。随着技术的不断进步,我们期待未来能有更多高效、安全、便捷的转染试剂问世。